И ещё вот - вакуум!

А тут вакуум пониже и пожиже, но тоже неплохо

А бутылки плющить - это детский сад какой-то.

Кстати, очень рекомендую - технопорно высшей пробы, в ассортименте.

Ютуб - https://www.youtube.com/@RuslanGeek (тут больше всего)
ВК - https://vk.com/ruslangeek
Телега - https://t.me/Ruslan_Geek

(не моё, я только разместил объяву %))) )

Суть метода заключается в анализе задержки между возбуждающим лазерным импульсом и последующим излучением флуоресценции молекулы. Это время жизни флуоресценции позволяет с высокой точностью характеризовать отдельные молекулы в образце. В отличие от традиционных методов, новый подход обеспечивает получение чередующихся серий изображений: одного сразу после возбуждения, а другого — через несколько наносекунд. Анализ таких данных позволяет быстро и эффективно определять время жизни флуоресценции.

Главным преимуществом данного метода является скорость и масштабируемость. С использованием камеры SPAD ученые могут получать точные данные о тысячах молекул менее чем за минуту, тогда как традиционные методы требуют порядка часа. По словам профессора Дж. Александры Раденович из лаборатории наноразмерной биологии (LBEN), хотя новая методика немного уступает классическим по точности, она значительно выигрывает в скорости и позволяет одновременно анализировать беспрецедентное количество молекул. Это открывает новые возможности для быстрого и масштабного анализа больших белковых образцов.

Разработка метода стала результатом тесного сотрудничества специалистов по детектированию одиночных молекул из LBEN и инженеров лаборатории продвинутой квантовой архитектуры (AQUA), а также компании EPFL PI Imaging Technology, которая создала используемую камеру. В процессе работы команда столкнулась с техническими вызовами — например, частота съемки оригинальной камеры не совпадала с частотой лазерных импульсов. Однако инженеры AQUA и Pi Imaging оперативно адаптировали устройство под требования эксперимента.

Кроме того, исследователи сотрудничали с лабораторией биомолекулярного моделирования EPFL под руководством Маттео Даль Пераро и группой Гильермо Акуны из Университета Фрибурга, которые занимаются изучением мембранных белков и ДНК-оригами соответственно. Такое междисциплинарное взаимодействие способствует расширению спектра применения метода.

После успешной демонстрации эффективности методики ученые начали применять ее для определения расстояния между молекулами с помощью резонансной передачи энергии Ферстера (FRET). Этот механизм основан на изменении времени жизни флуоресценции молекулы-«донора» в присутствии молекулы-«акцептора» поблизости. Измерение времени жизни флуоресценции пар молекул позволяет получать информацию о расстоянии между ними с точностью до нескольких нанометров.

Текущие методы FRET применимы преимущественно к небольшим образцам, тогда как новая система способна масштабировать исследования, обеспечивая быстрое изучение динамики тысяч молекул одновременно.

Разработанный метод открывает широкие перспективы в различных областях науки и техники. По мнению профессора Раденович, потенциал технологии ограничен лишь воображением исследователей. Одним из перспективных направлений является улучшение мультиплексированных анализов — одновременного измерения нескольких параметров в одном образце. Это особенно актуально для таких областей, как пространственная транскриптомика, где важно измерять экспрессию генов с сохранением точной пространственной информации о расположении клеток и структур в ткани.

Благодаря способности одновременно считывать данные о множестве молекул на протяжении всего времени жизни образца, этот метод может стать мощным дополнением к современным омикс-технологиям с высоким пространственным разрешением. Такие технологии позволяют комплексно и систематически изучать различные биологические уровни организма на клеточном и молекулярном уровнях.

Таким образом, новая методика визуализации на базе однофотонной камеры SPAD представляет собой значительный шаг вперед в области молекулярной биологии и биофизики, обеспечивая высокую скорость, масштабируемость и точность анализа, что открывает широкие возможности для фундаментальных исследований и прикладных задач.